Definizione di microscopia a contrasto di fase
Le cellule viventi non colorate non assorbono quasi nessuna luce. Uno scarso assorbimento della luce provoca differenze molto piccole nella distribuzione dell'intensità dell'immagine. Ciò rende le cellule appena o non visibili al microscopio in campo chiaro. La microscopia a contrasto di fase è una tecnica di microscopia ottica che converte gli spostamenti di fase della luce che passa attraverso campioni trasparenti in cambiamenti di luminosità nell'immagine.
Fu descritto per la prima volta nel 1934 dal fisico olandese Frits Zernikes.
Principi di microscopia a contrasto di fase
Quando la luce attraversa le cellule, si verifica un piccolo sfasamento invisibile all'occhio umano. Nella microscopia a contrasto di fase, questi spostamenti di fase vengono convertiti in cambiamenti di ampiezza e si possono osservare differenze nel contrasto dell'immagine.
Funzionamento del microscopio a contrasto di fase
L'illuminazione parzialmente coerente prodotta da una lampada alogena al tungsteno viene diretta attraverso uno specchio collettore e focalizzata su un anello dedicato (anello del condensatore etichettato) situato nel piano focale anteriore del condensatore del sottostadio.
Il fronte d'onda che passa attraverso lo spazio anulare illumina il campione e non viene deviato o diffratto in fase e ritardato dalla struttura e dai gradienti di fase presenti nel campione.
La luce non diffratta e diffratta raccolta dalla lente dell'obiettivo viene isolata dalla piastra di fase sul piano focale posteriore e focalizzata sul piano dell'immagine intermedio, formando così l'immagine finale a contrasto di fase osservata nell'oculare.
